Une cause inattendue de variation de l’immunomarquage de HER2 dans le cancer du sein (2022)

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Annales de Pathologie

Volume 24, Supplement 1,

November 2004

, Page 131

But de l’étude

Dans le cancer du sein, nous avons remarqué des variations du score de HER2 sur des blocs en paraffine analysés à plusieurs reprises selon la même technique, ainsi que sur des lames blanches adressées pour avis par des laboratoires extérieurs. Nous avons ainsi voulu tester l’effet du vieillissement des rubans de paraffine et des lames blanches sur l’immunomarquage de HER2.

Matériel et Méthodes

La sélection a porté sur 7 cas de cancer du sein classés en score 3+ (2 cas) ou à un score 2+ (5 cas) selon la grille Herceptest, avec l’Ac monoclonal CB11 (NOVOCASTRA) utilisé en routine. Neuf conditions différentes affectant la phase précédant la procédure IHC ont été étudiées : 1) étalement immédiat du ruban et traitement des lames blanches après séchage une nuit à l’étuve à 56° (condition standard), 2-3) conservation du ruban à 4° ou 21° (t° ambiante) pendant 7 jours, étalement et traitement des lames après séchage, 4-5) étalement immédiat du ruban et conservation des lames blanches à 4° ou 21° pendant 7 jours avant traitement, 6-9) conservation du ruban à 4° ou 21° pendant 7 jours, étalement puis stockage des lames blanches à 4° ou 21° pendant 7 jours avant traitement. Afin de limiter la subjectivité de lecture et pallier les éventuels problèmes d’hétérogénéité spatiale de marquage, un même territoire a été photographié pour chaque cas aux différentes conditions, à × 40, 100 et 400. Les 189 images numériques ont été réparties en 21 planches regroupant les 9 conditions d’un même cas. Elles ont été analysées à l’aveugle par 3 observateurs de façon indépendante et les 9 images ont été classées selon un gradient d’intensité du signal, du plus fort au plus faible.

Résultats

Une baisse significative du signal a été observée dans 3 conditions qui avaient en commun la conservation des lames à 21° pendant 7 jours. Si cette baisse affectait peu les scores 3+, trois des 5 cas de score 2+ sont par contre passés en score 1+. Le stockage du ruban à 21° n’a pas altéré le signal ni aggravé l’effet délétère du vieillissement des lames. Le marquage des lames conservées à 4° était superposable à celui des lames traitées sans délai. Discussion : Les variations d’intensité des immunomarquages sont généralement attribuées à des fixations ou des techniques IHC différentes. Cette étude conforte l’idée que des variations de marquage de HER2 peuvent être liées au délai de traitement des lames. Elle mériterait d’être étendue à d’autres anticorps anti HER2. En plus de l’impact thérapeutique, cette baisse de signal peut affecter les résultats des contrôles qualité nationaux qui reposent sur la préparation d’un grand nombre de lames blanches et leur envoi par la poste. Enfin, cette problématique est susceptible de se poser avec d’autres marqueurs prédictifs nécessitant une quantification.

Conclusion

La conservation des lames à t° ambiante pendant 7 jours avant traitement avec l’Ac monoclonal CB11 pourrait conduire à sous-évaluer le score de HER2.

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    Comparative genotoxicity of aluminium and cadmium in embryonic zebrafish cells

    Mutation Research/Genetic Toxicology and Environmental Mutagenesis, Volume 750, Issues 1–2, 2013, pp. 19-26

    Aluminium is a toxic metal whose genotoxicity has been scarcely studied in aquatic species and more generally in mammals. Recently, human and ecological disaster caused by the discharge of red mud in Hungary has revived questions about the toxicity of this metal particularly for the environment. On the contrary, cadmium is a highly toxic metal whose genotoxicity has been well characterized in various mammalian cells. However on non-human cells, little is known about its impact on DNA damage and repair.

    In this study, the genotoxic potential of both metals on embryonic zebrafish cells ZF4 was analyzed and particularly the impairment of the major DNA double strand breaks (DSB)-repair pathway, i.e. non-homologous end-joining (NHEJ).

    To this aim, DNA single strand breaks (SSB) and DSB were evaluated using the comet assay and the immunodetection of γ-H2AX proteins, respectively, in AlCl3 or CdCl2 exposed ZF4 cells. These exposures result in the production of DSBs a few hours after incubation. The DNA-PK kinase activity, essential for NHEJ, is more affected by the presence of aluminium than cadmium. Altogether our data provide evidence of the high toxicity induced by aluminium in zebrafish and indicates the pertinence of genotoxicity evaluation in organisms living in contaminated water.

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    Reprise chirurgicale des carcinomes canalaires in situ pour exérèse non in sano: existe-t-il des facteurs de risque?

    Gynécologie Obstétrique & Fertilité, Volume 41, Issue 4, 2013, pp. 228-234

    Le carcinome canalaire in situ (CCIS) est une lésion mammaire fréquente (10% des cancers du sein). Le traitement de référence consiste dans la plupart des cas en une mastectomie partielle (MP) associée à une irradiation adjuvante. Cependant, en cas de marges envahies (<2mm), une reprise chirurgicale est nécessaire. Le but de notre étude était de déterminer le taux de reprise pour des berges envahies dans les CCIS et de définir d’éventuels facteurs de risque préopératoires de berges non saines.

    Il s’agit d’une étude rétrospective incluant 63patientes. Nous avons réuni les cas de CCIS au CHRU de Lille ainsi qu’au centre hospitalier de Valenciennes du 1er janvier 2007au 1er janvier 2012.

    Cinquante patientes ont eu une MP et 28patientes (56%) ont dû avoir une ou deux interventions complémentaires pour obtenir des marges d’exérèse saines. La taille anatomopathologique de la tumeur (>10mm) apparaît comme étant un facteur de risque de berges d’exérèse envahies.

    Peu d’études ont cherché à définir des facteurs de risque de berges non saines pour les CCIS. Les principaux facteurs de risque retrouvés dans la littérature sont les suivants: la présence de comédonécrose, une taille supérieure à 10mm, une tumeur palpable, l’absence de réalisation d’une biopsie préchirurgicale, les lésions de bas grade. Notre étude a permis de confirmer l’influence d’une taille tumorale supérieure à 10mm comme facteur de risque de berges non in sano.

    Ductal carcinoma in situ (DCIS) is a common breast lesion (10% of breast cancers). In most of the cases the standard treatment is a partial mastectomy combined with adjuvant irradiation. However, when positive margins (<2mm) occur, surgical re-excision is necessary. The purpose of our study was to determine the rate of reoperation for positive margins in DCIS and identify potential preoperative risk factors of unhealthy margins.

    This is a retrospective study of 63 patients. We collected cases of DCIS at the Lille and Valenciennes’ hospitals from the 1st of January 2007 till the 1st of January 2012.

    Fifty patients have had a partial mastectomy and 28 patients (56%) have had one or two complementary interventions to get healthy resection margins. The pathologic tumor size (>10mm) appears to be a risk factor for positive margins.

    Few studies were aimed at identifying risk factors for unhealthy margins for DCIS. The main risk factors found in the literature are: the presence of comedonecrosis, tumor greater than 10mm, a palpable tumor, the absence of a preoperative biopsy, the low-grade lesions. Our study confirmed the influence of tumor size greater than 10mm as a risk factor for positive margins.

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    Double strand break repair and γ-H2AX formation in erythrocytes of medaka (Oryzias latipes) after γ-irradiation

    Environmental Pollution, Volume 224, 2017, pp. 35-43

    The study of the DNA damage response in erythrocytes after γ-irradiation may provide evidence for its effectiveness as a biomarkers for genotoxic environmental stress. We previously reported various malformations in erythrocytes of medaka irradiated with10 Gy, but not in their micronuclei. In this study, we optimized an assay method for γ-H2AX and double strand breaks in erythrocytes of adult medaka fish after 15Gy of γ-irradiation. The highest level of apoptosis and nuclear abnormalities, including in micronuclei, were recorded 4h after γ-irradiation, as was the highest level of γ-H2AX foci in erythrocytes. These results suggest that recognition and repair processes occur as a response to DNA damage in erythrocytes in medaka.

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    Caractérisation moléculaire des cancers du sein en pratique clinique

    Gynécologie Obstétrique & Fertilité, Volume 44, Issue 5, 2016, pp. 285-292

    Le cancer du sein correspond à un groupe hétérogène de tumeurs. Les objectifs de cette revue de la littérature sont de proposer une synthèse des principales méthodes actuellement disponibles dans la pratique clinique pour caractériser les CS sur le plan moléculaire et de discuter de leur place dans l’évaluation pronostique et prédictive aux traitements. Les récepteurs hormonaux et le statut HER2sont des marqueurs pronostiques et prédictifs de réponse aux thérapies ciblées; leur étude par immunohistochimie est systématique. Le Ki67est un marqueur pronostique certain mais sa fiabilité est contestée du fait d’une faible reproductibilité intra- et inter-observateur et inter-laboratoire. Les signatures génomiques commercialisées sont toutes validées comme outils pronostiques et aident les praticiens aux décisions thérapeutiques. Du fait de leur coût, ces signatures sont actuellement à réserver aux indications équivoques de chimiothérapie.

    Breast cancer involves various types of tumors. The objective of this review was to provide a summary of the main methods currently available in clinical practice to characterize breast cancers at a molecular level and to discuss their prognostic and predictive values. Hormonal receptors expression and the HER2 status are prognostic markers and can also predict the response to targeted therapies. Their analysis through immunohistochemistry is systematical. Ki67 is an effective prognostic marker, but its reliability is debated because of its low reproducibility between laboratories and between pathologists. Commercial genomic signatures are all considered valid prognostic tools and may guide physicians to make therapeutic choices. These signatures are costly and should therefore be restricted to situations in which the use of chemotherapy remains equivocal.

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    Detection and quantification of Parascaris P-glycoprotein drug transporter expression with a novel mRNA hybridization technique

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    Theoretical study on the regulation of circadian rhythms by RNA methylation

    Journal of Theoretical Biology, Volume 490, 2020, Article 110140

    Messenger RNAs are often destabilized by methylation, suggesting that mRNA methylation alters mRNA and protein dynamics. This may indicate that the gene regulatory system is reflected by the metabolic system through mRNA methylation because methylation substrates are components of the metabolic system. Elucidating the mechanisms by which mRNA methylation regulates gene regulatory systems has posed considerable challenges due to the numerous targets of mRNA methylation. Recent studies have demonstrated that inhibition of mRNA N6-methyladenosine methylation elongates circadian periods. The aim of this study was to understand the mechanisms by which mRNA methylation regulates circadian rhythms. Using a detailed realistic model and a simple model, we demonstrated that period elongation of circadian rhythms by decreasing mRNA methylation can be achieved by two possibilities, i.e., decreasing mRNA methylation stabilizes nonoscillatory mRNAs such as Ck1δ and/or stabilizes oscillatory mRNAs of clock genes such as Per and Cry. In addition, we predicted that period elongation by stabilizing nonoscillatory mRNA (Ck1δ) should always be accompanied by the distortion of the circadian waveform. Finally, we discuss the validity of the two possible mechanisms on the regulation of circadian rhythms by mRNA methylation by quantifying waveform distortion of circadian gene activity data with or without mRNA methylation inhibitors.

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Author: Ouida Strosin DO

Last Updated: 07/11/2022

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